什么是酵母双杂交系统
2025-01-04 17:19:03酵母双杂交系统(Yeast Two-Hybrid System, Y2H)是一种 用于分析蛋白质-蛋白质相互作用的实验方法。该系统基于真核生物调控转录起始过程的认识,通过将待研究的两种蛋白质分别克隆(融合)到酵母表达质粒的转录激活因子(如GAL4等)的DNA结合结构域(DNA-BD)和转录激活域(AD)上,构建成融合表达载体。这些融合蛋白能够相互作用,激活酵母中的报告基因,从而从表达产物中分析两种蛋白质是否发生了相互作用。
酵母双杂交系统具有以下特点:
高灵敏度:
能够检测到蛋白质之间微弱的、瞬间的作用。
广泛适用性:
适用于研究哺乳动物、高等植物等多种生物体中的蛋白质相互作用。
操作简便:
基于现有的分子生物学技术,易于操作和实施。
通过酵母双杂交系统,研究人员可以更深入地了解蛋白质在细胞内的相互作用网络,揭示基因功能和调控机制。